Fluoreszenz-Doppelfärbung mit Hoechst 33342 und Acridinorange zur Bestimmung der Arten von Ciliaten (Phylum: Ciliophora)
Thilo Bauer
Beschrieben wird eine neue Methode der Doppelfärbung mit den Fluorochromen Hoechst 33342 (Ho342) und Acridinorange (AO). Die Methode der Doppelfärbung ist einfach in der Handhabung und wird insbesondere empfohlen für die systematische Bestimmung der Arten von Ciliaten (Phylum: Ciliophora). Die Methode färbt Zellkerne (allgemein: DNA) spezifisch in blauer Farbe und färbt darüber hinaus Phagosome, Lysosome, Acidosome, ciliäre Granula sowie in einigen Fällen auch Trichocysten in verschiedenen Farben von grün bis rot. AO stellt bei bestimmten Gattungen charakteristische Muster der Ciliatur dar, indem ciliäre Vakuolen und Granula besonders gefärbt erscheinen. Eine korrekte Interpretation der Färbung wird ausführlich diskutiert. Die Methode erlaubt Life-Cell-Imaging, kann für alle bisher beobachteten Arten der Ciliaten angewandt werden und ist frei von Artefakten. Daher ersetzt die Fluoreszenz-Doppelfärbung mit Ho342 und AO die bislang empfohlene Supravitalfärbung mit Methylgrün-Pyronin. Die Methode wird erfolgreich angewandt bei der Bestimmung der Arten von Ciliaten während eines mehrjährigen Monitoring der Ciliaten im Naturschutzgebiet "Verbrannte Maar/Hellenmaar" (SU- 044) nahe Bornheim (Rheinland).
Bauer T. Fluoreszenz-Doppelfärbung mit Hoechst 33342 und Acridinorange zur Bestimmung der Arten von Ciliaten (Phylum: Ciliophora). Mikroskopie. 2019; 1: 2-19.
DOI: 10.5414/MKX00192A
Volltext: www.researchgate.net